ITALIANO

Concetti e conoscenze di base delle principali tecniche molecolari in uso in diagnostica nei laboratori di Patologia clinica

M. Cioffi “Manuale di diagnostica di laboratorio” Minerva medica
T. Strachan A.P. Read. “Genetica umana molecolare” UTET

Il corso ha l’obiettivo di consentire allo studente di conoscere le principali tecniche molecolari utilizzate per la determinazione di mutazioni e polimorfismi noti coinvolti in varie patologie, per screening mutazionali, nella diagnosi di microrganismi e nella diagnosi della resistenza ai farmaci

- Fondamenti di fisica e chimica generale
- Fondamenti di biologia e biochimica
- Fondamenti di fisiologia
- Fondamenti di microbiologia

Lezioni frontali e lavoro interattivo con gli studenti. Saranno condivisi con gli studenti file pdf delle diapositive delle lezioni. Queste sono da considerarsi un supporto allo studio sui libri di testo. Sono previste, durante e dopo l'erogazione dell'insegnamento, attività di tutorato che lo studente potrà concordare con il docente.

L’esame si svolge contestualmente alla valutazione degli insegnamenti del C.I. La verifica è finalizzata ad accertare il conseguimento degli obiettivi formativi, in coerenza dei risultati di apprendimento attesi e con i descrittori di Dublino. Il voto finale, espresso in trentesimi, riflette il livello complessivo di padronanza dei contenuti: da eccellente (30 e lode) a sufficiente (18/30). Il voto finale è espresso collegialmente dalla Commissione d’esame che, tenendo conto del livello di apprendimento dimostrato nei diversi ambiti disciplinari e delpeso di ciascun insegnamento, formula un giudizio unitario riferito all’intero Corso Integrato. La prova si considera superata con un punteggio minimo di 18/30, corrispondente al possesso delle conoscenze e delle competenze di base previste, nonché alla loro applicazione a semplici contesti della pratica assistenziale.

Per chiarimenti e problematiche inerenti agli argomenti dell’ insegnamento gli studenti possono rivolgersi al docente di riferimento secondo le modalità di ricevimento indicate nella pagina web

1. Estrazione, precipitazione, separazione analitica e dosaggio degli acidi nucleici

2. PCR (Polymerase Chain Reaction). Amplificazione nested. Multiplex PCR

3. RT-PCR (Reverse Transcription-PCR)

4. Real-time PCR

5. Strategie per la determinazione di mutazioni e polimorfismi:
PCR-CTPP (PCR-Confronting Two Pair Primers)
PCR-ARMS (PCR-Amplification Refractory Mutation System)
PCR-reverse dot-blot
Enzimi di restrizione e loro applicazione nella diagnosi di mutazioni, PCR-RFLP (PCR- restriction fragment length polymorphism)

6. La PCR nella diagnostica microbiologica

7. Determinazione della sequenza di un acido nucleico mediante Sequenziamento automatico diretto (Metodo di Sanger)

8. Next Generation Sequencing (NGS)

9. Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MLPA) per analisi di riarrangiamenti

Italian

Basic concepts and knowledge of the main molecular techniques used in diagnostics in Clinical Pathology laboratories

T. Strachan A.P. Read. “Genetica umana molecolare” UTET English version

The course aims to enable students to become familiar with the main molecular techniques used for the identification of known mutations and polymorphisms involved in various diseases, for mutational screening, in the diagnosis of microorganisms, and in the diagnosis of drug resistance.

Fundamentals of Physics and General Chemistry

Fundamentals of Biology and Biochemistry


Fundamentals of Physiology


Fundamentals of Microbiology

TFrontal and interactive lessons with students. PDF files of the lecture slides will be shared with the students. These should be regarded as a study aid to complement the textbooks. Tutoring activities will be available during and after the delivery of the course, and students may arrange them with the instructor.

The examination is conducted simultaneously with the assessment of the courses included in the Integrated Course (I.C.). The assessment is intended to verify the achievement of the educational objectives, in accordance with the expected learning outcomes and the Dublin Descriptors. The final grade, expressed on a scale of 30, reflects the overall level of mastery of the course content, ranging from excellent (30 with honors) to satisfactory (18/30). The final grade is determined collectively by the Examination Committee, which, taking into account the level of learning demonstrated across the different disciplinary areas and the weight of each course, formulates a single overall evaluation for the entire Integrated Course. The examination is considered passed with a minimum score of 18/30, corresponding to the acquisition of the required basic knowledge and competencies, as well as their application to simple contexts of clinical nursing practice.

or clarifications and issues related to the course topics, students may contact the lecturer in charge according to the office hours and procedures indicated on the webpage.

ranslation into English:

Extraction, precipitation, analytical separation, and quantification of nucleic acids

PCR (Polymerase Chain Reaction). Nested amplification. Multiplex PCR

RT-PCR (Reverse Transcription PCR)

Real-time PCR

Strategies for the determination of mutations and polymorphisms:

PCR-CTPP (PCR–Confronting Two-Pair Primers)

PCR-ARMS (PCR–Amplification Refractory Mutation System)

PCR reverse dot-blot

Restriction enzymes and their application in mutation diagnosis, PCR-RFLP (PCR–Restriction Fragment Length Polymorphism)

PCR in microbiological diagnostics

Determination of nucleic acid sequence by direct automated sequencing (Sanger method)

Next Generation Sequencing (NGS)

Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MLPA) for the analysis of genomic rearrangements